肉的宰后嫩化侧重点归因于肌原玻纤设备构造的严重破坏，肌原玻纤设备构造是由内源性淀粉酶酶电离酶化学化学降解肌原玻纤和体组织核骨架淀粉酶酶带来的。与几十块年来一致是加关注视点的钙淀粉酶酶酶不一样，胱天淀粉酶酶酶（caspases）之前称为感好感语录题。胱天淀粉酶酶酶在体组织核凋亡的执行工作环节起着至关比较重要的做用，里面caspase-3在人死了淀粉酶酶电离中的做用是供需双多个方面和简化的，但是会进的一步研发。S-亚硝基化使用自动调理钙施放、热量基础代谢、淀粉酶酶质化学化学降解和体组织核凋亡来自动调理色泽，具有嫩度和持水效果。项目前期研发察觉S-亚硝基化会调低依靠线粒体的caspase-3级联作用，这很有可能是手臂肌肉体组织核凋亡和牛肉片品格影响的理由。caspase-3的研发侧重点是其与体组织核凋亡的相互影响，然后，不多有研发初探S-亚硝基化自动调理caspase-3的体制。

2024年9月由长沙农产品加工高校张万刚客座教授团队图片在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生物工程为该研究提供了亚硝基化淡化组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

中文字幕微信标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

刊物：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2025年损害因素：5.7

收录耗时：2024年9月

合作方行业：南京农业大学

的研究建筑材料：蛋白

拜谱供应高技术：亚硝基化修饰组学

新技术自驾路线：

一、深入分析结局

01.Caspase-3吸附性

近几年尚不非常清楚NO对caspase-3的压做成用能不归因于NO介导的S-亚硝基化，各种不同含量均值的GSNO做外源性NO供给，以成脂caspase-3的离体S-亚硝基化。成果表达，与没能GSNO的组优于，100、200和400μM GSNO组的caspase-3可溶性取得调低（图1），与原本报道范文一致性。GSNO处里调低caspase-3可溶性的隐藏理由仍尚需揭示。

图1 各种不同溶度的GSNO除理对caspase-3催化活性的导致

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化方面

调查Caspase-3的亚硝基化潜在性上，以确立GSNO对Caspase-3的反馈性。经GSNO操作后，验测到caspase-3血清S-亚硝基化的强度增高（图2）。这样的数据表示，外源性GSNO培植可完美诱导型caspase-3的身体S-亚硝基化。最让人目瞪口呆的是，在都没有GSNO具有的比较组中验测到一家衰弱的S-亚硝基化带，这表示caspase-3也许会出现内源性的S-亚硝基化。不仅而且，本调查中caspase-3的S-亚硝基化潜在性上较高，而caspase-3的活性酶类拉低，这与之间的调查不符。只不过，caspase-3的特女性朋友S-亚硝基化突显位点尚不清理，还可以进1步的探险。

图2 GSNO清理对caspase-3S-亚硝基化能力的导致

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化掩盖组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的编码字段。粉色标示的编码字段标识S-亚硝基化肽，红标示的C标识S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱图

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3可降解结蛋白质

结淀粉酶用于属于为比较重要的内部骨架淀粉酶，在保证肌内部机构的机构完善性和做收缩性管理方面起着为比较重要功能，论述S-亚硝基化caspase-3对结淀粉酶溶解塑料的强烈性具为比较重要重大意义。与Std（未用胱天淀粉酶酶-3和GSNO孵育的一开始肌纤维棉材料淀粉酶）组相比较，0 μM GSNO组（肌原纤维棉材料和caspase-3的孵育，无GSNO）的完善结淀粉酶含水量强势拉低，温馨提示caspase-3对结淀粉酶具意向的淀粉酶淀粉酶酶质水解专业能力。在GSNO孵育后，完善结淀粉酶的含水量明显的不断增加（P < 0.05）。除此以外，当GSNO氨水浓度上升时，完善结淀粉酶的含水量快速调整（P < 0.05）（图5）。一种出现 表示，SNO体现的caspase-3以水平方向依耐的方案可以抑制结淀粉酶的溶解塑料。

图5.S-亚硝基化caspase-3吸附结蛋白质

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3溶解肌钙淀粉酶-T

肌钙核血清酶质-T (TnT)是原肌球核血清酶质调整负责管理肌收缩毛孔的细条的都要肌原弹性食物化学纤维核血清酶质。TnT的挥发重要性特点是判断到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化环境下，caspase-3对TnT的挥发症状如下图6下图，与Std组（含有caspase-3和GSNO的肌原弹性食物化学纤维）差距，caspase-3组中30 kDa TnT情节重要性提高，得出结论caspase-3参加了TnT的挥发，因此，caspase-3与GSNO的孵育出现30 kDa TnT上升。在100和200 μM GSNO组中没判断到清晰的异同(P > 0.05)，而当GSNO的质量浓度符合400 μM 时，该情节重要性下降(P < 0.05)。某些感觉得出结论了SNO装饰的caspase-3对TnT挥发的转换做用。结核血清酶质和TnT是caspase-3的刺激性底物，而GSNO处置较低了caspase-3的几丁质酶也许 出现肌原弹性食物化学纤维核血清酶质挥发的程度较低了。由此可见经验，NO诱导性的S-亚硝基化行实现装饰半胱氨酸残基来调整caspase-3的几丁质酶，因而进一点干扰其对结核血清酶质和TnT的核血清酶质溶解水平，最后干扰羊肉品控。

图6. S-亚硝基化caspase- 3溶解肌钙蛋白质-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、工作小结

本钻研重要途径试论S-亚硝基化对caspase-3表达的关系举例随即对羊肉肌原食物纤维材料身体吸附的关系。血清酶S-亚硝基化应该表达caspase-3的半胱氨酸残基，而使导至caspase-3吸附性削减，进1步减缓了其对羊肉肌原食物纤维材料血清酶的血清酶淀粉水解专业能力。

三、拜谱个人总结

理论深入分析分为了酶活测定法，亚硝基化呈现语组学概述，WB等判断方式方法，找到血清质S-亚硝基化就能够呈现语caspase-3的半胱氨酸残基，这产生了caspase-3化学活化的减轻，并举一步骤减缓了其对牛羊肉肌原纤维材料血清质的血清质淀粉水解实力。本理论深入分析为回答血清质质亚硝基化对肉嫩的调空机能提供了打了个个新的角度 。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的核膳食纤维组学、表达核膳食纤维组学、分泌组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸题材护肤品，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺酸性反应、total被氧化保存、游离于巯基，欢迎大家咨询！

考生论文资料：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663